Sociedad Española de Anatomía Patológica y División Española de la International Academy of Pathology  XXV Congreso de la Sociedad Española de Anatomía Patológica
y División Española de la International Academy of Pathology
XX Congreso de la Sociedad Española de Citología
I Congreso de la Sociedad Española de Patología Forense
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Zaragoza, 18 a 21 de mayo de 2011

 INFORMACIÓN SOBRE COMUNICACIONES ORALES Y PÓSTERES ACEPTADOS

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Comunicación oral nº 83. Tema: Nuevas tecnologías (inmunohistoquímica, inmunocitoquímica y patología molecular)

Detección de la mutación EGFR en material citológico. Experiencia del Hospital Universitari Vall d 'Hebron
N Tallada Serra, A Solsona Flotats, M Alberola Ferranti, C Iglesias Felip, C Dinarès Fernandez, S Ramón y Cajal, J Hernandez Losa
Hospital Vall d Hebron
natalia.tallada@gmail.com

Introducción:La patología molecular utiliza los ácidos nucleicos y las proteínas para poner de manifiesto mecanismos moleculares y genéticos relacionados con el crecimiento neoplásico.La determinación de algunas alteraciones permite dirigir terapias específicas en pacientes oncológicos con resultados esperanzadores.Los ensayos clínicos y de investigación van dirigidos a encontrar dianas terapéuticas. El EGFR es un proto-oncogen ligado al dominio de la tirosin Kinasa e interviene en la secuencia del proceso de crecimiento tumoral. El ADN se extrae del tejido tumoral (fresco,congelado o en bloque de parafina).La detección de la mutación en pacientes con diagnóstico de adenocarcinoma (ADC)de pulmón (especialmente en mujeres no fuma- doras con subtipos de ADC bien diferenciados) y en estadíos avanzados es importante dada la buena respuesta al tratamiento con gefitinib. El objetivo es presentar nuestra experiencia en la detección de la mutación de EGFR en material citológico y los resultados globales de la serie de nuestro hospital.

Material y métodos:Se han estudiado 177 muestras (172 pacientes :92 varones/ 85 mujeres) con diagnóstico de ADC. Se ha realizado en 91 casos en material citológico :PAAF 61, Broncoaspirado (BAS)6,Lavado broncoalveolar 2,Esputo 7 y L.Serosos 15 y 86 casos en tejido parafinado.Se procede a rascado directo de la extensión previo tratamiento con Buffer G2,recogida en un eppendorf estéril y posterior incubación a 56º durante 2 horas(48h.tejido parafinado).Se extrae el ADN mediante el protocolo “DNA tissue Kit” de Qiagen®. La calidad del ADN se comprueba mediante amplificación con actina.Se amplifican y secuencian los exones 19 y 21 del gen que codifica para el receptor EGFR según el protocolo descrito por Taron y cols (2005).

Resultados:Se ha detectado la mutación en 20 casos(11.2%): 8 en material citológico (5 PAAF,2 BAS,1 L.pericárdico )y 12 en tejido parafinado.Se ha detectado con más frecuencia la mutación del exón 21 (L858R), 13 casos y 7 en el exón 19(DEL 747-751). 3 casos resultaron no valorables para la técnica ( 2 biopsia, 1 citologia)

Conclusión:En nuestra experiencia el material citológico es idóneo para estudios moleculares. La citología permite más rapidez en el procedimiento de extracción del ADN y mejor calidad al tratarse de células tumorales no sometidas a procedimientos previos ( secadas al aire o fijación con alcohol).Hemos detectado la mutación en 20 casos (11.2%). En nuestra opinión el mayor número de mutaciones detectado en material de biopsia no está en relación ni a la técnica ni al tipo de muestra citológica

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Actualizado: 11/06/2011